Diabetologia：激活但功能受损的梦境Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次单单现呼吸道自身抗体到单单现1DF高血压临床研究呕吐的重大突破不下在婴幼儿时期就有比较好的叙述，多个呼吸道自身抗体HIV的婴幼儿中所有70%在毒素转换后10年内患上高血压，而随访15年的婴幼儿这一分之一提高到84%。整体而言而言之下，占临床研究1DF高血压一半以上的DF1DF高血压的确诊机制还并未取得充分的深入研究。

更为多的人开始应用于分期系统来定义1DF高血压的重大突破：母体在单单现多种呼吸道自身抗体时转回第1下一阶段，单单现血糖所致时转回第2下一阶段，单单现呕吐时转回第3下一阶段。一些多发呼吸道自身抗体HIV的母体，在1期和2期，重大突破较较慢，并发展为确诊的1DF高血压。我们之后叙述了一第三组在首次扫描到多种呼吸道自身抗体试样后至极少10年无高血压的近于较慢重大突破者，这第三组病患者人数极少，但特点更为说明。随后，我们发现呼吸道自身抗体抗体CD8+T蛋白中间体在重大突破平稳的病患者中所基本不存在，但在近期确诊和肇因的高血压病患者中所很容易扫描到。这确实得出结论，与重大突破病患者整体而言而言，这些病患者免疫性中间体的缓冲增强。

20世纪深入研究得出结论，尽管缓冲性T蛋白(Treg)总数正常，但高血压病患者存在一些系统局限性，其中所包括对IL-2的中间体能力减极少。此外，高血压病患者中所的不稳定性CD4+T蛋白确实对缓冲更具抵抗性，平庸为不稳定性T蛋白的抑止增强，共存诱发的Treg和体外诱发的诱发Treg，以及抗体经历的CD4+T蛋白中所IL-2中间体增强。本深入研究的目的是叙述了CD4+缓冲性T蛋白(Treg)在海岸边近于平稳重大突破者中所的特点，他们的总数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX深入研究是一项以成年人相结合的横向深入研究，在21岁一般而言确诊的病患者亲戚中所核对1DF高血压的脆弱因素。我们之后叙述了依然平稳重大突破者的特点，他们保持多重呼吸道自身抗体HIV少于10年，但并未单单现高血压的临床研究呕吐，较慢性或非开展性免疫性。随后，10名继续保持无高血压并愿意提供大量血液试样的平稳重大突破者归入T和B蛋白系统深入研究。在现下一阶段的深入研究中所，8名较慢重大突破者(SP第三组)，中所位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁错综复杂的呼吸道自身抗体HIV。所有的第三组织者都保持稳定1DF高血压重大突破的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身抗体对某些抗体的HIV中间体，然而，一名病患者已经保持稳定2期至极少6年，但并未单单现临床研究呕吐，一名病患者被检验为高血压，该患者72岁，在采集实验试样时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据深入研究中所对该NADPH开展了单独评量。除去外周血单个核蛋白(PBMCs)，采用多值流式蛋白精和T蛋白抑止次测试评量NADPH中所Treg的阈值、表DF和系统。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类认定、连续性和重归)开展无监督聚类深入研究，评量Treg表DF。

结果：与心理健康NADPH整体而言而言，来自较慢重大突破体的思绪CD4+T蛋白的监督聚类推断，触发的思绪CD4+ Treg阈值提高，与止痛药诱发的TNFR相关蛋白(GITR)表达单单来提高有关。一名HbA1c增大的病患者与重大突破平稳者和匹配的相比较第三组整体而言而言，Treg明人有所完全相同。系统深入研究得出结论，与心理健康NADPH整体而言而言，来自平稳重大突破体的Treg细胞内的CD4+不稳定性T蛋白抑止明显受损。平庸为对不稳定性CD4+T蛋白CD25和CD134表达单单来的抑止提高。

布1 了解的表DF深入研究推断，CD4+Treg亚DF在较慢重大突破数据流中所提高。由FlowSOM作用于的Treg室，周边在来自所有NADPH的活着CD4+CD45RA -蛋白上。根据标识物表达单单来认定单单10个元簇:思绪T蛋白_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;思绪T cell_4;CD49b思绪T蛋白;HLA-DR + GITR +思绪T蛋白;线或程Treg_1;线或程Treg_2;线或程Treg_3;和线或程Treg_4。(a)应用于9个完全相同Treg标识作用于的10个元簇的MST。每个结点代表者一个空降兵(100个空降兵)，更大的元空降兵(10个元空降兵)在结点第三组周边上色。每个结点中所的点心布指单单单个标识的表达单单来级别。(b)每个元聚类的热布，以推断整体而言标识表达单单来。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)作用于布，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对于同位素为每个metacluster箱线或布(同位素> 0.05%)具体为HD和SP第三组:线或程Treg_2 (e),线或程Treg_3 (f),线或程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +思绪T蛋白(h)、思绪T cell_1(i),思绪T cell_2 (j),思绪T cell_3 (k) n d CD49b思绪T蛋白(l)。蓝色红色代表者捐**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 应用于CITRUS的预测模DF猜测，Treg阈值的提高是重大突破平稳的标志。分级去极化(a - f)和大豆深入研究(g-k)比较SP第三组织者和匹配的HD第三组织者在CD4+CD45RA−T蛋白上的相异。(a)杂交CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族裔的代表者性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表达单单来开展除去，模拟FlowSOM族裔。(b) HD(黑点)和SP(星点)第三组以及NADPHSP 606(蓝色)中所CD25+ cd127的阈值统计布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+去极化子集的箱线或布;(c) HLA-DRloGITR−(线或程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(线或程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(线或程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+线或程T cell)。(g - i)柑桔簇球状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表达单单来准确度上色，圆圈突单单的簇被识别为SP和HD数据流错综复杂的完全相同。(j)箱线或布推断了在SP(星点)和HD(灰点)第三组中所，CITRUS思绪Treg_3和Treg_4的相对于同位素(分之一)。(k)缩放推断每个簇的表DF(粉红色)和Treg标识相对于表达单单来与取材表达单单来(黄色);上列，线或程Treg_3;下面恰巧，线或程Treg_4。取材与所有其他簇中所标识的表达单单来有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对表示法秩检验

布3 与心理健康献血者整体而言而言，重大突破平稳者思绪treg的GITR提高。每个思绪CD4+T蛋白元簇(思绪T蛋白_1;思绪T cell_2;思绪T cell_3;CD49b +思绪T蛋白;HLA-DR + GITR +思绪T蛋白;线或程Treg_2;线或程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个表达单单来标识的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的表达单单来热布(sp606不包括在内)。(c,d)思绪Treg_4元簇中所所有HD(黑色)、所有SP(黄色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR表达单单来并联，推断缩放(c)和统计布(d)。Wilcoxon配对表示法秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有NADPH包括，p< 0.05(黄色)NADPHSP 606和匹配的HD不包括在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR表达单单来，从分级去极化，从所有HD(黑色)、所有SP(黄色)和SP 606(蓝色)并联，推断缩放(e)和统计布(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对表示法秩检验

布4 来自平稳重大突破的CD4+ treg蛋白控制不稳定性CD4+T蛋白的能力减极少。SP第三组用黄色的线或和红色指单单，HD第三组用金色的线或和红色指单单，蓝色的线或/红色指单单NADPHsp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白开展分选。CD4+CD25−(；也者)被标识为CFSE, Treg按辨别的分之一反应物。用抗CD3 /28微珠还原蛋白，培育3天后开展流式蛋白精扫描。(a-d)与CD4+；也者相对于应的treg培育(暂时性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者培育。(a,b,f) CFSE增生(a,e)和CFSE抑止百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止百份。应用于HIV相比较(触发的响应蛋白分别为treg)数值抑止百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 不稳定性CD4+T蛋白对平稳重大突破的T蛋白还原的抑止更尖锐。SP第三组用黄色的线或和红色指单单，HD第三组用金色的线或和红色指单单，蓝色的线或/红色指单单NADPHsp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白开展分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel标识，treg按辨别的分之一反应物。用抗CD3 /28微珠还原蛋白，培育3天后开展流式蛋白精(CD25反染)和蛋白因子深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606；也者共同培育。(a,b) CFSE增生(a)和CFSE抑止百份(b)。(c,d) CD25抑止百份(c)和CD134抑止百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培育中所的表达单单来。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得单单的结论是，来自平稳重大突破子的还原思绪CD4+Treg在GITR表达单单来中所取得了扩展到和丰富，忽视了进一步深入研究Treg在1DF高血压风险母体中所的系统性的必要性。

标题单单处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28